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水稻細菌性條斑?。˙LS)作為由Xanthomonas oryzae pv. oryzicola(Xoc)引發(fā)的毀滅性病害,每年給全球水稻產(chǎn)業(yè)造成巨額產(chǎn)量損失,更是我國重點(diǎn)防控的檢疫性病害。傳統檢測技術(shù)始終存在諸多瓶頸:癥狀觀(guān)察與形態(tài)鑒定準確率偏低,PCR技術(shù)依賴(lài)昂貴設備難以現場(chǎng)應用,等溫擴增易出現假陽(yáng)性,血清學(xué)方法靈敏度不足,核酸提取過(guò)程還易受干擾。針對這些痛點(diǎn),一項發(fā)表于《Agricultural and Food Chemistry》的研究,創(chuàng )新開(kāi)發(fā)出IC-RPA-CRISPR/Cas12a檢測方法,為水稻細菌性條斑病的精準防控提供了全新解決方案。其中,研究中的CRISPR/Cas12a部分使用的正是我司提供的JY0301 CRISPR Cas12/13 HybriDetect試紙條。

該方法的核心創(chuàng )新在于將免疫捕獲、重組酶聚合酶擴增(RPA)與CRISPR/Cas12a切割技術(shù)深度融合,構建了“捕獲-擴增-檢測”的高效閉環(huán)。檢測流程簡(jiǎn)潔高效:首先通過(guò)特異性Xoc單克隆抗體,在預涂抗體的PCR管壁上精準捕獲目標細菌,省去復雜核酸提取步驟;隨后在PCR管內完成RPA核酸擴增,快速放大目標基因信號;最后利用CRISPR/Cas12a特異性識別切割擴增產(chǎn)物中的TTTN序列及ssDNA報告探針,通過(guò)信號讀取實(shí)現檢測。

更值得關(guān)注的是,該方法提供了三種靈活的讀數模式,適配不同應用場(chǎng)景:qPCR機器可實(shí)現精準定量檢測,紫外燈能快速觀(guān)察熒光信號,側流試紙條則支持現場(chǎng)可視化讀數,無(wú)需復雜儀器。性能測試顯示,該方法特異性極強,對7種Xoc菌株均能精準識別,而對其他9種水稻病原菌無(wú)交叉反應;靈敏度更是實(shí)現質(zhì)的飛躍,qPCR模式檢測限低至2 CFU/mL,紫外燈模式為6 CFU/mL,側流試紙條模式為60 CFU/mL,較常規PCR和Dot-ELISA靈敏度提升256倍。
在實(shí)際應用中,該方法表現同樣出色。對我國不同省份的9批水稻種子檢測結果,與PCR檢測完全一致,可準確排查帶菌種子;針對田間采集的44份水稻葉片樣品,研究人員還開(kāi)發(fā)了基于保溫杯和側流試紙條的無(wú)儀器檢測方案,操作簡(jiǎn)便且結果可靠,為田間現場(chǎng)快速檢測提供了可能。
這項集高靈敏度、強特異性、多場(chǎng)景適配于一體的檢測技術(shù),有效解決了水稻細菌性條斑病檢測的痛點(diǎn)難題,為病害早發(fā)現、早防控提供了有力支撐。未來(lái),隨著(zhù)與微流控芯片等平臺的結合,該方法將進(jìn)一步提升檢測效率與便捷性,在水稻種子檢疫、田間病害監測等實(shí)際生產(chǎn)場(chǎng)景中發(fā)揮更大作用,為保障糧食安全筑牢技術(shù)屏障。
相關(guān)產(chǎn)品:
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貨號 |
產(chǎn)品 |
規格 |
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TABAS03KIT |
TwistAmp Basic Kit DNA擴增試劑盒 |
96T |
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TAEXO02KIT |
TwistAmp exo 試劑盒 |
96T |
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B8201C1 |
DNA恒溫快速擴增試劑盒(DNA基礎型) |
48T |
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B8202C3 |
DNA恒溫快速擴增試劑盒(DNA熒光型) |
48T |
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B8203C5 |
DNA恒溫快速擴增試劑盒(DNA試紙條型) |
48T |
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B8204C7 |
RNA恒溫快速擴增試劑盒(RNA基礎型) |
48T |
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B8205C9 |
RNA恒溫快速擴增試劑盒(RNA熒光型) |
48T |
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B8206C0 |
RNA恒溫快速擴增試劑盒(RNA試紙條型) |
48T |
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JY0209 |
雙靶標HybriDetect側向層析試紙條(彩虹型) |
50T |
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JY0201 |
單靶標HybriDetect側向層析試紙條(彩虹型) |
50T |
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JY0307 |
CRISPR單酶切及擴增產(chǎn)物檢測試紙條 |
50T |
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JY0301 |
CRISPR Cas12/13 HybriDetect試紙條 |
50T |
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JY0308 |
CRISPR雙酶切檢測試紙條(變色龍) |
50T |