產(chǎn)品簡(jiǎn)介

RNA pull-down是檢測目標RNA與其結合蛋白或結合RNA之間相互作用的主要方法之一。生物素 RNA Pull-Down 試劑盒利用鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強親和力，高效調取目標RNA及其結合蛋白或結合RNA。

首先制備生物素標記的RNA探針，與植物樣本裂解液孵育，RNA探針與樣本中的某些蛋白質(zhì)或RNA結合形成復合體；鏈霉親和素磁珠特異性捕獲生物素標記的RNA探針，同時(shí)捕獲其結合蛋白或結合RNA；之后可以采用Western Blot、質(zhì)譜（LC-MS/MS）方法檢測結合蛋白，或者采用qPCR、測序（seq）方法檢測結合RNA。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應的試劑，每個(gè)反應使用40μL磁珠。由于每次pull-down實(shí)驗至少需要設置一個(gè)實(shí)驗組和一個(gè)陰性對照組，因此一次實(shí)驗至少需要使用2個(gè)反應的試劑量。

額外所需材料

1. 自備材料：生物素標記的RNA探針或制備探針所需的材料【T7體外轉錄試劑盒、DNA 凝膠回收試劑盒、生物素RNA 標記混合物（Biotin RNA labeling Mix）、RNA純化試劑盒（RNeasy Mini Kit）】，微量RNA提取試劑盒或提取RNA 所需的材料【Trizol、氯仿、異丙醇、75%乙醇、RNase-free 水】，PBS。

2.所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機、超聲波破碎儀。

使用說(shuō)明

I 注意事項

1. 請勿干燥或劇烈渦旋磁珠，禁止長(cháng)時(shí)間置于磁場(chǎng)，這些操作可能會(huì )引起磁珠聚團，降低結合活性。

2. 為保證磁珠均勻分布，請在使用前通過(guò)反復顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。

3. 請務(wù)必使用無(wú) RNase 的離心管、槍頭等實(shí)驗材料。

4. 具體樣品量和孵育時(shí)間依賴(lài)于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

說(shuō)明書(shū)：F1512 生物素RNA Pull-Down 試劑盒（植物）.pdf (206.85 K)