產(chǎn)品簡(jiǎn)介

circRNA Pull-Down 試劑盒利用利用“F2 標簽” 與其特異性配體的強親和力，高效調取細胞中的目標 cirRNA 及其結合蛋白或結合 RNA。F2 標簽是一段短的 RNA 序列，與目標 circRNA 連接后，幾乎不影響其結構和功能。

實(shí)驗前先將 F2 標簽序列與目標 circRNA 序列連接，構建成 F2-circRNA 過(guò)表達載體，轉染并裂解目的細胞， 之后采用特異性配體磁珠來(lái)調取 F2-circRNA 及其結合蛋白或結合 RNA。去除未結合的物質(zhì)后，洗脫蛋白質(zhì)或提 取 RNA 進(jìn)行檢測。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應的試劑，每個(gè)反應使用40μL磁珠。由于每次pull-down實(shí)驗至少需要設置一個(gè)實(shí)驗組和一個(gè)陰性對照組，因此一次實(shí)驗至少需要使用2個(gè)反應的試劑量。

額外所需材料

1.自備材料：F2-circRNA 過(guò)表達細胞、PBS、RNase-free 水、微量 RNA 提取試劑盒或提取 RNA 所需的材料 【Trizol、氯仿、異丙醇、75%乙醇】。

2.所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機、超聲波破碎儀。

使用說(shuō)明

I 注意事項

1. 請勿干燥或劇烈渦旋磁珠，禁止長(cháng)時(shí)間置于磁場(chǎng)，這些操作可能會(huì )引起磁珠聚團，降低結合活性。

2. 為保證磁珠均勻分布，請在使用前通過(guò)反復顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。

3. 請務(wù)必使用無(wú) RNase 的離心管、槍頭等實(shí)驗材料。

4. 具體樣品量和孵育時(shí)間依賴(lài)于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

說(shuō)明書(shū)：F1510 circRNA Pull-Down 試劑盒（動(dòng)物）.pdf (219.07 K)